簡要描述:THP-1人單核細胞白血病種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細胞白血病細胞系。它來自一位急性單核細胞白血病患者的血液,有分化為多種巨噬細胞的能力,是各領域研究常用的細胞系之一。
產(chǎn)品型號: YKLTHP-1
所屬分類:細胞庫
更新時間:2024-04-29
THP-1人單核細胞白血病THP-1人單核細胞白血病
種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天
培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S
推薦傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃
當細胞密度達到約8x10^5cells/ml左右時,即可進行傳代。由于是懸浮細胞,可直接將細胞吸出,離心之后傳代。傳代最少濃度不應少于1x10^5 cells/ml。
去掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,加入PBS進行沖洗,并去上清;
加入YM進行潤洗,并去上清;
放入CO2培養(yǎng)箱消化2-4min;
加入培養(yǎng)基終止消化,并吹打均勻。
收貨時細胞出現(xiàn)偽足,或是碎片較多怎么辦?
受到運輸影響,懸浮細胞會短暫性出現(xiàn)形態(tài)改變的現(xiàn)象,如偽足等。通過傳代培養(yǎng),1周左右可以恢復正常。一些細胞在運輸途中死亡而產(chǎn)生碎片,通過傳代離心可以去除(見上文傳代篇)。
培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生貼壁怎么辦?
少量細胞貼壁屬于正常情況,將細胞懸液轉移至新瓶中即可。當貼壁細胞的比例高于20%,說明細胞生長環(huán)境有異常,需排查培養(yǎng)箱設置、培養(yǎng)基成分,以及培養(yǎng)器皿是否異常。
培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生聚團怎么辦?
少量細胞聚團,呈葡萄串狀,屬于正?,F(xiàn)象,特別是細胞密度較低時,易出現(xiàn)這種情況。更換血清品牌或增大血清比例(不超過20%)有助于解決聚團問題。不建議將聚團的細胞吹散,等待密度高時,會自己分散開。
培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇嗎?
β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應激對THP-1細胞的影響。當細胞密度過大但需要維持時,可適當增加巰基乙醇的比例(不超過標準量的1.5倍)。
鏡下觀察時,難以聚焦或估算密度怎么辦?
懸浮細胞會隨著液體流動,不容易聚焦,靜置5-10分鐘使細胞沉底,之后在輕輕放上顯微鏡觀察,將有助于聚焦和估算細胞密度。