簡要描述：SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細胞貼壁生長密度達到傳代密度且細胞活性在90%以上時，可以凍存細胞，在超凈臺中將要凍存的細胞移入離心管，1000rpm離心5min，棄上清，用90%培養(yǎng)液+10%DMSO的混合液重懸細胞，并調整細胞密度為4-6×106/ml，將細胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。
產品型號： RSK-MEL-1
所屬分類：細胞庫
更新時間：2024-04-30
SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細胞
SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細胞
傳代操作步驟：
一、貼壁細胞傳代
1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。
2.吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞。
3.加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡。
5.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
二、懸浮細胞傳代
1.將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min。
2.棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液。
3.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)的過程中，經常見到黑色的顆?；蛐『邳c，這種情況是怎么引起的呢？該怎么避免呢？原因：
黑點，大概有細胞本身帶的，環(huán)境有的，還有人身上帶進細胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基
1、如果小黑點有增殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理；
2、如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞生長，也不影響實驗的話，則可能
